2개의 DNA를 PCR을 이용해 붙이는 방법에 대한 질문

원래는 PCR 결과라고 적어놓은 것 중에 위에것만 생각하고 이렇게 물어보려고 했습니다.

에.. PCR을 했을 때 4번 유전자?가 3'과 5' 방향이 바뀌게 되잖아요.(상보적인 DNA를 보면 3번 유전자도 방향이 바뀌게 되지요.) 그러면 읽는 방향이 아에 바뀌어버리니깐 만들어지는 단백질 등등도 다를 거라고 생각되는데 어떻게 이 방법이 서로다른 DNA를 합치는 방법이 될 수 있나요.

그런데 말이죠...

질문을 하려고 그리다보니깐 primer 3을 붙여서 만든 DNA와 primer 4를 붙여서 만든 DNA가 가운데 서로 상보적이게 만든 애들을 빼고 같게 나와요... 왜요?! 어째서?!!!

그리고 왜 PCR 결과가 완전한 gene 1과 gene 2의 결합이 아닌거지요?

제가 틀린건가요, 아님 원래 pcr 결과가 이렇게 나오는건가요...

누가 설명좀(위에 질문도♡) 해주세요!

여담.

미생실험에서도 중요하다고 하고 미생교수님도 이것하나만은 너희 머릿속에 남겨놓고 수업을 끝내야겠다고 한 내용이에요. 후후후

그런데 아직도 이해못함

[토마호크톰]

..........할라할라? -_-);;;;;;;;;

[월광[月光]]

뭐랄까...
그런 부분 배운 거라고는 '어떤 약 넣으면 유전자가 갈라져서 그걸로 부모관계 확인하거나... 어쩌고 저쩌고'
그런 것밖에 없네요 ㅠㅠ

[동글몽실]

월광님/ 뭔가 신기하게들려요.

크으. 그림 참 잘그린것 같아요

[[탈퇴계정]]

과연 문피아에도 능력자분이 있을까요ㅜㅡ 너무 복잡해요..

[슬로피]

ㅇㅅㅇ;;미생실험이 미생물인가요.
내친구도 그거 듣던데...ㅇㅅㅇ;

나름 생2를 배웠는데, 하나도 이해가 안ㄱ....
알아듣는건 DNA하나네요.ㅋㅋㅋㅋㅋ

[icy]

유전자는 1과 2 두개 밖에 없습니다. Gene1은 1번과 2번 DNA strand로, Gene2는 3번과 4번 strand로 구성되어 있군요.
질문자가 착각하는 것은 1,2,3,4를 독립적인 유전자로 보는 것입니다.
일반적인 상황에서 볼때, 1, 3 strand가 유전정보를 가지고 있고, 2,4 strand는 상보적인 서열일 뿐 유전정보를 지니지 않습니다.(ORF가 아님)

위 그림에서 보여주는 것은 정리한면,
1단계 : primer1이 2번 strand에 붙어서 PCR합니다. 연결부위가 융합된 1번 strand가 형성되는 것이죠(1')
그림에는 빠져있는데, 5'쪽에 primer가 더 필요합니다. 아마도 primer3면 되겠네요
primer3이 변형된 1'strand에 붙어 PCR 되므로 2번 strand도 역시 수정됩니다.(2')
비슷하게 primer2에 의해 4번 strand가 수정되죠(4'). 3번도 수정됩니다.(3')


2단계 : 그림에서 primer3과 4로 PCR되는 것처럼 표기되어 있는데, 틀립니다.
strand도 이상하군요.

제대로 되려면, 1'과 4'이 만나야 합니다.
두 strand가 연결부위에서 붙어서(그림처럼) primer 역할을 해줍니다.
따라서 1'strand가 주욱 확장되어 1'-3'이 됩니다.(4'을 template으로 하면 3'이 합성되죠?)
반대의 경우는 2'-4'이 합성됩니다. 1'-3'과 2'-4'는 서로 상보적입니다.

3단계 : 1'-3'이나 2'-4' 같이 길어진 strand를 template로 primer3과 4가 PCR 합니다.
이러면 길어진 DNA가 증폭됩니다.

2/3단계는 따로 할수도 있지만 한번에 수행할 수 있습니다.
다 넣어주면(1', 2', 3', 4' + primer3/4) 알아서 주욱 진행됩니다.

[동글몽실]

우울우울님/
그리고 저 1,2,3,4를 서로 다른 유전자로 보진 않아요...
그림에도 gene 1과 gene 2만 적어놨지 않습니까! ;ㅅ;
다만..strand라는 단어가 생각안났을뿐. ☞☜

[icy]

동글몽실님/
ㅋㅋㅋ. 제가 지레짐작했군요...
방향을 신경쓰시는 거 같길래 그렇게 생각했습니다.
처음 배울때 방향을 헛갈리는 경우가 종종 있거든요.

추천하는 건 위, 아래 strand에서 sense strand 그니까 보통 위에 있는 (왼쪽에 5'이 있는) 한쪽 strand만 기준으로 신경쓰시는 겁니다.